期刊简介
本刊是一本综合性医刊,主要介绍本省在医学临床、教学、科研上取得的新成果、新发现、新进展,促进学术交流,普及与提高相结合,提高全省医学发展水平,增进群众身体健康。读者对象是中、高级医务工作者。
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- 杂志名称:安徽医学杂志
- 主管单位:安徽省卫生厅
- 主办单位:安徽省医学情报研究所
- 国际刊号:1000-0399
- 国内刊号:34-1077/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国学术期刊(光盘版)全文收录期刊期刊收录:维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏
重组人组织型纤溶酶原激活剂衍生物在毕赤酵母中的表达
章晟;陈薇;于长明;传玲;杨秀旭;徐俊杰;刘树玲;朱曼;翁少洁;于婷
关键词:毕赤酵母, 重组人组织型纤溶酶原激活剂衍生物
摘要:目的 在毕赤酵母中表达重组人组织型纤溶酶原激活剂衍生物(rPAm),并检测rPAm的活性.方法 用PCR从质粒pLFrGGI上扩增出目的 蛋白(rPAm)基因,再亚克隆到酵母表达载体pMEX9K中,转化到宿主菌GS115,菌落PCR鉴定转化子,重组酵母经甲醇诱导后,通过SDS-PAGE及Western-blot分析鉴定表达产物,再通过层析法纯化目的 蛋白,用溶圈法测定目的 蛋白的活性.结果 表达的重组蛋白分子量约为50 kD.纯化后的目的 蛋白的纯度可达到95%.Western-blot显示能与抗tPA抗体特异性结合,纯化后rPAm比活性为5.02×105 IU/mg,比活性与t-PA相当.结论 成功构建了rPAm酵母表达工程菌,建立了对目的 蛋白的纯化方法.
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